In vitro activity of Artemisia annua L (Asteraceae) extracts against Rhipicephalus (Boophilus) microplus / Atividade in vitro de extratos de Artemisia annua L (Asteraceae) sobre Rhipicephalus (Boophilus) microplus

The activity of plant extracts on parasites may indicate groups of substances that are potentially useful for controlling Rhipicephalus (Boophilus) microplus. The aim of the present study was to investigate the in vitro action of Artemisia annua extracts on this tick. The concentrations of the sesquiterpene lactones artemisinin and deoxyartemisinin present in plant extracts were quantified via high-performance liquid chromatography. Four extracts produced from the concentrated crude extract (CCE) were evaluated on larvae using the impregnated paper method, with readings after 24 hours of incubation. The engorged females were immersed in the CCE and in its four derived extracts for five minutes, with incubation for subsequent analysis of biological parameters. The extracts were not effective on the larvae at the concentrations tested (3.1 to 50 mg.mL-1). The CCE showed greater efficacy on engorged females (EC50 of 130.6 mg.mL-1 and EC90 of 302.9 mg.mL-1) than did the derived extracts. These results tend to confirm that the action of artemisinin on engorged females of R.(B.) microplus is conditional to their blood intake. In this case, in vitro methods would be inadequate for effective evaluation of the action of A. annua on R. (B.) microplus.

A atividade de extratos vegetais sobre parasitas pode indicar grupos de substâncias de uso potencial no controle de Rhipicephalus (Boophilus) microplus. O objetivo do presente estudo foi investigar a ação in vitro de extratos de Artemisia annua sobre esta espécie. A concentração das lactonas sesquiterpênicas artemisinina e deoxiartemisinina presentes nos extratos vegetais, foi quantificada via cromatografia líquida de alta eficiência. Quatro extratos produzidos a partir do extrato bruto concentrado (EBC) foram avaliados sobre larvas pela metodologia do papel impregnado, com leitura após 24 horas de incubação. As fêmeas ingurgitadas foram imersas por cinco minutos no EBC e nos seus quatro extratos derivados, e incubadas para posterior análise dos parâmetros biológicos. Os extratos não tiveram eficácia sobre as larvas nas concentrações avaliadas (de 3,1 a 50 mg.mL-1). O EBC apresentou melhor eficácia sobre as fêmeas ingurgitadas (CE 50 de 130,6 mg.mL-1 e CE 90 de 302,9 mg.mL-1) que os extratos derivados. Esses resultados tendem a confirmar que a ação da artemisinina sobre as fêmeas ingurgitadas de R. (B.) microplus estaria condicionada à sua ingestão através do sangue. Nesse caso, os métodos in vitro seriam inadequados para a efetiva avaliação da ação de A. annua R.(B.) microplus.

Efficacy evaluation of a commercial neem cake for control of Haematobia irritans on Nelore cattle / Avaliação da eficácia de uma torta comercial de nim para o controle de Haematobia irritans em bovinos Nelore

Much attention has been given to the development of botanical insecticides to provide effective natural control of cattle ectoparasites without harming animals, consumers, and environment. This study evaluated the efficacy of a commercial neem cake in controlling Haematobia irritans infestation on cattle. The study was conducted at the Embrapa Southeast Cattle Research Center (CPPSE), in São Carlos, SP, Brazil, from April to July 2008. The neem cake mixed in mineral salt in a 2 percent concentration was provided to 20 Nelore cows during nine weeks and had its efficacy evaluated by comparison of the infestation level against a control group. Fly infestations were recorded weekly by digital photographs of each animal from both groups and the number of flies was later counted in a computer-assisted image analyzer. Quantification of neem cake components by high-performance liquid chromatography revealed the presence of azadirachtin (421 mg.kg-1) and 3-tigloyl-azadirachtol (151 mg.kg-1) in the tested neem cake. Addition of the 2 percent neem cake reduced mineral salt intake in about 22 percent. The 2 percent neem cake treatment failed to reduce horn fly infestations on cattle during the 9-week study period.

Muita atenção tem sido dada ao desenvolvimento de inseticidas vegetais buscando-se um efetivo controle de ectoparasitas de bovinos, sem prejudicar animais, consumidores e meio ambiente. Este estudo, realizado de abril a julho de 2008, na Embrapa Pecuária Sudeste, em São Carlos, SP, Brasil, avaliou a eficácia de uma torta comercial de nim (Azadirachta indica) no controle da mosca-dos-chifres (Haematobia irritans) em bovinos. A torta de nim, misturada ao sal mineral na concentração de 2 por cento, foi fornecida a 20 vacas Nelore, durante nove semanas, e sua eficácia foi monitorada através de contagens semanais nos grupos tratado e controle. Infestações individuais foram registradas por meio de fotos digitais em todos os animais de ambos os grupos, e o número de moscas foi, posteriormente, quantificado com o auxílio de um sistema de análise de imagem computadorizado. A quantificação dos componentes da torta de nim, por cromatografia líquida, revelou a presença de azadiractina (421 mg.kg-1) e 3-tigloyl-azadirachtol (151 mg.kg-1). A adição da torta de nim a 2 por cento reduziu o consumo de sal mineral em cerca de 22 por cento. O tratamento com torta de nim a 2 por cento não reduziu as infestações por mosca-dos-chifres em bovinos durante as nove semanas do estudo.

Anaplasma marginale infection in cattle from south-western Amazonia / Infecção por Anaplasma marginale em bovinos na Amazônia Sul Ocidental, Brasil

The present study provides the first epidemiological data regarding infection by Anaplasma marginale in cattle reared in south-western Brazilian Amazonia. One simple procedure was adapted for the extraction of DNA from blood clots collected in seven microregions of Rondônia State and two mesoregions of Acre State. PCR method was used to asses the frequency of A. marginale infections in 4 to12-month-old cattle. The cattle infection was investigated by polymerase chain reaction (PCR) using the specific primer "msp5" for A. marginale. The DNA amplifications revealed that the mean frequency of A. marginale infection was 98.6 percent (1,627/1,650) in samples from Rondonia, and 92.87 percent (208/225) in samples from Acre. The high frequency of A. marginale infections in 4 to 12-month-old cattle indicate a situation of enzootic stability in the studied areas and are comparable to those detected by immunodiagnosis in different endemic regions in Brazil. The DNA extraction of clotted blood method described here can be used for epidemiological studies on anaplasmosis and other bovine hemoparasites.

O presente estudo fornece os primeiros dados epidemiológicos relativos a infecção por Anaplasma marginale em bovinos criados na Amazônia Sul Ocidental brasileira. Foi adaptado um procedimento simples para a extração de DNA a partir de coágulos sanguíneos coletados em sete microrregiões do estado de Rondônia e duas mesoregiões do estado do Acre. A técnica da reação em cadeia da polimerase (PCR) foi aplicada para avaliar a freqüência da infecção por A. marginale em bovinos com idade entre 4 e 12 meses. Após a extração do DNA de cada amostra, a infecção nos bovinos foi investigada pela amplificação do gene "msp5" de A. marginale. As técnicas de amplificação do DNA revelaram que a freqüência de infecção por A. marginale foi de 98,6 por cento (1.627/1.650) nas amostras provenientes de Rondônia e de 92,87 por cento (208/225) nas amostras do Acre. A alta freqüência da infecção por A. marginale nos animais com idade entre 4 e 12 meses indica uma situação de estabilidade enzoótica nas regiões estudadas, as quais são comparáveis às detectadas por técnicas de imunodiagnóstico em outras regiões endêmicas no Brasil. A extração do DNA através do método aqui descrito pode ser utilizado em estudos epidemiológicos sobre a anaplasmose bovina e outros hemoparasitas.

Artificial infestation of Boophilus microplus in beef cattle heifers of four genetic groups

Resistance of beef cattle heifers to the cattle tick Boophilus microplus was evaluated by artificial infestation of 66 beef cattle heifers of the following genetic groups: 16 Nelore (NE), 18 Canchim x Nelore (CN), 16 Angus x Nelore (AN) and 16 Simmental x Nelore (SN). The animals, with a mean age of 16.5 months, were maintained with no chemical tick control in a Brachiaria decumbens pasture. Four artificial infestations with 20,000 B. microplus larvae were carried out 14 days apart and from day 18 to day 22 of each infestation the number of engorged female ticks (> 4.5 mm) was counted on the left side of each heifer. Data were analyzed as the percentage of return (PR = percentage of ticks counted relative to the number infested), transformed to (PR)», and as log10 (Cij + 1), in which Cij is the number of ticks in each infestation, using the least squares method with a model that included the effects of genetic group (GG), animal within GG (error a), infestation number (I), GG x I and the residual (error b). Results indicated a significant GG x I interaction, because AN and SN heifers had a higher percentage of return than CN and NE heifers, while CN heifers showed a higher percentage of return than the NE heifers only in infestations 3 and 4. Transformed percentages of return were NE = 0.35 ± 0.06, AN = 0.89 ± 0.06, CN = 0.54 ± 0.05 and SN = 0.85 ± 0.06.